Thème "Métabolisme dans les extraits de cellules"

La vie peut être décomposée en un ensemble défini de réactions chimiques qui sont catalysées par des enzymes et composent un vaste réseau dense et hautement connecté appelé métabolisme. Nous proposons d’étudier le métabolisme dans des extraits cellulaires actifs (CFE), obtenus par la lyse des cellules et la séparation ultérieure de leurs composants solubles. La résonance magnétique nucléaire (RMN) est un outil bien adapté et non destructif permettant l’identification et la quantification de petites molécules organiques dans une matrice complexe, à la fois à un moment donné ou tout au long de réactions chimiques en temps réel.

 
Nous avons adapté des méthodes de RMN pour surveiller des paramètres physicochimiques tels que le pH simultanément à la concentration de métabolites au cours d’une réaction chimique, et nous avons décrit des séquences RMN pour l’identification spécifique de métabolites phosphorylés dans des échantillons biologiques complexes. Nous étudions l’activité glycolytique et la partition voie des pentoses phosphates/glycolyse dans l’EFC en fonction des pools de cofacteurs. Nos résultats confirment que les cofacteurs peuvent avoir une forte influence sur le flux glycolytique, faisant écho à ce qui a été observé in vivo, mais suggèrent également d’autres hypothèses sur le rôle des cofacteurs sur le métabolisme central.